-
兔多克隆抗血清的制備
發(fā)布時間： 2023-04-12 點擊次數(shù)： 1028次材料與儀器
抗原
PBS 乙醇
注射針頭 注射器 培養(yǎng)箱步驟
1. 取2 ml 的弗氏完-全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中，使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液，接上22G注射針頭，排出注射器中的氣泡。2. 將兔子敢在固定架上，用一只手抓住兔的頸背部毛皮，另一只手托住兔的后腿及臀部，將兔束緊固定以使后肢不能伸張，用70%乙醇對所要注射的區(qū)域進行清潔消毒，在后肢大腿肌肉內(nèi)進針約1 cm 深，毎條大腿肌肉內(nèi)最多注射0.5 ml 乳化液。3. 四周后，用1 mg 的混溶干弗氏不完-全佐劑的抗原乳化液（1：1）對兔進行肌肉內(nèi)加強免疫注射，操作步驟同1和2，初次加強免疫后2周再次進行加強免疫注射。
4. 第二次加強免疫注射10天后，從兔的耳緣靜脈處放血。
（1）先將兔固定在固定架上（固定緊），使其耳朵伸出，用70%乙醇洗潔消毒一側(cè)耳朵。
（2）將兔耳置于熱燈之下，用手指輕輕地拍打兔耳；1~2 min 內(nèi)兔耳上的血管即會充分地充盈。
（3）用一消毒過的解剖刀 的鋒尖在兔耳緣靜脈上迅速劃一長約0.5 cm 的小口，收集兔血于50 ml 的塑料離心管中，直至傷口不再流血為止。
（4）使兔血順管壁下落，以避免發(fā)生溶血。5. 將兔耳擦拭干凈，涂以70%乙醇，在耳朵傷口上涂一層凡士林，以減輕由乙醇產(chǎn)生的皮膚刺激感。6. 將兔血在室溫下靜置數(shù)小時后置4 ℃過夜，用一木質(zhì)的撥棒將血凝塊輕輕地挑松并使之由離心管的側(cè)壁脫落，將血洧移到合適的離心管中，5 000 g 離心10 min，去除殘留的紅細胞及其他碎片。7. 每兩星期進行進一步的加強免疫。每次加強免疫后10天，可采集一次兔血，兔的兩只耳朵可輪流交替進行采血。8. 采用ELISA法或RIA法對血清中的特異性抗體進行滴度測定。如果需要的話。
深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域的產(chǎn)品供應線，在各個領域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術支持與服務。
- 下一篇：B 淋巴細胞膜表面免疫球蛋白的檢查
- 上一篇：怎么培養(yǎng)好你的細胞
產(chǎn)品中心
Products
