細胞為啥總是一言不合就抱團生長？！

是細胞污染了還是正常現(xiàn)象？

是消化不好了還是鋪板有問題？

抱團細胞越來越多，怎么樣才能讓細胞分開生長？

請認(rèn)真閱讀以下干貨，看看能否幫您答疑解惑！

細胞抱團一定代表細胞狀態(tài)不好嗎？

▲RAW264.7細胞-正常狀態(tài)

▲RAW264.7細胞-異常狀態(tài)

▲H9c2細胞-正常狀態(tài)

▲H9c2細胞-異常狀態(tài)

3、細胞抱團是因為細胞污染了嗎？一般細胞培養(yǎng)液清亮，就不是污染。如果是污染了的話，可以通過觀察培養(yǎng)液顏色，若污染，則很渾濁。

細胞為啥總是喜歡抱團？

• 細胞死亡釋放出DNA，纏繞其他細胞，形成黏性的細胞團（消化的過程可能過于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太強或有毒性等）。

• 細胞離心速度過大或時間太長。

• 消化不*的時候，細胞和細胞之間的連接沒有分開；消化過度的時候，圓形的細胞容易聚堆，再分開很困難！

• 狀態(tài)不好、老化的細胞，也可能會出現(xiàn)抱團生長的情況（比如換液不及時、長的太滿才傳代、污染等造成的細胞狀態(tài)差）。

• 傳代時沒有吹打均勻，細胞團多，培養(yǎng)時就會是一團一團的。

• 傳代后細胞鋪板不均勻。

• 有可能是雜細胞，或者死細胞。

• 細胞未消化開。

• 非震蕩培養(yǎng)或細胞量過多的話就會成團。

如何避免細胞抱團？

• 用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞。

• 對于貼壁非常牢固的細胞（如MDCK），為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，建議分多批多次消化，這樣才能最大限度地降低胰酶對細胞的損傷，保證細胞的狀態(tài)能夠*。

• 細胞生長密度不要太高，70%－80％就好（細胞剛剛基本成單層細胞，沒有出現(xiàn)堆疊生長），這樣細胞抱團的幾率就大大減少了。如果細胞已經(jīng)長成集落，可先將細胞低密度傳代，第二天再消化傳代，這樣連續(xù)傳三次，細胞抱團就會越來越小，這樣幾代過后，再按照常規(guī)消化方法和時間能將細胞逐漸傳成單個的。

• 消化過程中最好不要使勁搖動培養(yǎng)瓶，這樣細胞特別容易成屑樣脫落。細胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個（因為細胞沒有受力點了，所以細胞很難分散開）。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，嚴(yán)格控制好消化程度。

• 消化過程需要使用槍頭輕輕吹打，切忌使勁拍培養(yǎng)瓶的側(cè)壁。拍瓶子想要將細胞拍散的力度對于細胞來說相當(dāng)于大地震，細胞本身是無法承受如此振蕩的。

細胞抱團了，要如何處理？